М а т е р и а л ы X I I В с е р о с с и й с к о й н а у ч н о - п р а к т и ч е с к о й к о н ф е р е н ц и и
П о с в я щ а е т с я 8 5 - л е т и ю в ы с ш е г о п е д а г о г и ч е с к о г о о б р а з о в а н и я в А р з а м а с е и
8 0 - л е т и ю п р о ф е с с о р а В я ч е с л а в а П а в л о в и ч а П у ч к о в а
93
В качестве модельных бактерий использовали 6 штаммов из коллекции
Научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии имени
Г.П. Сомова:
Staphylococcus aureus
6539;
Listeria monocytogenes
310 8078 B-
4835/6;
Listeria monocytogenes
315 9852 B-6144/1, 4, 6;
Salmonella enterica serovar
typhimurium
3695;
Salmonella enterica
подвид
enterica serovar enteridis
;
Escherichia сoli
1147.
Культивирование бактерий производили в 96-луночных полистирольных
планшетах на жидкой питательной среде КД с добавлением экстрактов
одноклеточных водорослей в разной концентрации [1].
Динамику образования биоплѐнок учитывали с 1 по 7 сутки при
температуре 37ºС. Для определения способности исследуемых штаммов
образовывать биоплѐнку применяли метод Кристенсена (1985) в модификации
О'толле (2011) основанный на спектрофотометрической оценке количества
связанного с биоплѐнкой 1%-ого раствора кристаллического фиолетового [8,12].
Оценку пленкообразования проводили измерением оптической плотности с
помощью планшетного ридера LABSYSTEMS iEMSReaderMF, Biorad при длине
волны 540 нм. Определение жизнеспособности бактерий осуществляли
посредством высева бактерий на чашки Петри. Подсчѐт выросших колоний
производили после 24-х часов культивирования при температуре 37ºС [1].
Для оценки воздействия экстрактов на бактерии использовали данные
оптической плотности. Далее определяли показатели удельной скорости роста
популяции бактерий и зависимость удельной скорости от концентрации
ингибитора, а также высчитывали коэффициент нелинейности ингибирования
при помощи модифицированного уравнения Иерусалимского [3]. Визуализацию
морфологии структуры биопленок и оценку воздействия водорослей проводили
при помощи сканирующего электронного микроскопа EVO 40 CarlZeissAG,
Германия.
В результате работы обнаружено, что экстракты, выделенные из
культуральной среды (экзометаболиты), и вытяжки, полученные из клеточной
массы микроводорослей (эндометаболиты), по-разному воздействовали на
патогенные микроорганизмы.
В случае использования экзометаболитов выявлено подавление
биопленкообразования в 44% проведѐнных опытов, в 23% стимулирование, в
33% нейтральное действие. Наиболее эффективными оказались внеклеточные
соединения
H. akashiwo
HAK - SR11 против
Staphylococcus aureus
6539
Listeria
monocytogenes
315 9852 B-6144/1, 4, 6;
Salmonella enterica serovar typhimurium
3695 (рис.1);
Salmonella enterica
подвид
enterica serovar enteridis,
а также
экстракты P.
foraminosum
PrRUS_7 (рис.2)., подавляющие рост всех бактерий,
тестируемых в работе.
